程颖：循环细胞在小细胞白血病临床研究中的进展

重复线粒体( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液体活检遗骸”，已在分散性乳脑肉瘤、癌和结直肠癌中会用于结节病评价。小线粒体前列腺癌(Small celllung cancer，SCLC)组织遗骸缺较少过剩，且不够理论上的追踪住院分散和预测结节病的微生物一个大。有约年来科学学术界CTCs在SCLC中会的医学领域进行时了探究性科学研究，辨认出CTCs对SCLC的临床、分期，追踪住院、分散，审核、结节病以及建立表征学疗依此依此方案等带有重要内涵，本文就CTCs在SCLC医学领域中会的科学研究进展不作研究课题。

一、SCLC病患CTCs的探测作依此

CTCs的探测作依此主要有流式线粒体探测高效率( fluocytometry，FCM)、遗传物质一聚合酶链自由基(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch的系统、CTC芯片(CTC-chip)高效率和膜滤过分离线粒体高效率(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其中会CellSearch的系统因其半自动化的操作SDK，很高的免疫、持久性和可重复性，踏入最常领域的CTCs探测作依此。

要到在2004年，Allard等首度领域CelISearch依此探测了99同上前列腺癌（尚未列举SCLC同上数）病患的CTCs，随后Nagrath等采用CTC-chip依此探测了55同上前列腺癌病患肺脏滴血C TCs。2009年此后的科学研究多采用CeIISearch依此探测SCI．C病患肺脏滴血CTCs，然而该作依此由于对不够上皮线粒体特征的线粒体会注意到漏检显然，且与免疫磁珠及免疫融合的CTCs尚未行某些不足之处的探测，医学领域受到局限于。

有约年来，随着纳米科技的的发展，凋亡CTCs表面一个大的免疫标记分f修饰的纳米材料融合扰流控高效率的CTCs探测SDK的科学研究受到为广泛瞩目，2013年，《自然》（Nature）时代周刊将CTCs纳米探测选为最具创新性和转化创造力的临床新作依此，成果引人注目。但就现阶段来看，现有的CTCs探测作依此各有利弊，尚未能科学研究断定哪种作依此对SCLC的CTCs探测更有优势。着眼将来，亟需开发免疫、持久性更高的CTCs探测高效率，为SCLC的基础和医学科学研究造就有所突破。

二、CTCs在SCLC医学领域中会的科学研究现况

（一）CTCs可用与SCLC的临床、分期

有约年来多项科学研究结果显示CTCs可用低水平与SCLC的临床、分期有紧密关系0 2009年Tanaka等领域CeIISearch依此探测了1 50同上7.5ml肺脏滴血CTCs，其中会前列腺癌1 25同上、非恶性25同上，前列腺癌病患仅限于116同上非小线粒体前列腺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9同上SCLC。

科学研究整体而言SCLC病患CTCs阳性率为66.70-/0（6同上／9同上），轻扰大于NSCLC病患的CTCs阳性率(脑肉瘤25.9%，鳞癌40.9%；脑肉瘤对比SCLC，P

翌年，Hou等领域CeIISearch依此探测了50同上初治的SCLC病患肺脏滴血CTCs，仅限于20同上局限于期SCLC (limited disease，LD-SCLC)病患和30同上为广泛期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)病患，弧期ED-SCLC及LD-SCLC病患的中会位CTCs可用共有237和2个/7.5ml滴血，7同上尚未已确定CTCs的病患以外为LD-SCLC，断言CTCs可用低水平与SCLC分期就其。

类似于的论证在2012年被日本语言学家Naito等断定，科学学术界在51同上SCLC病患中会立用CeIISearch依此探测弧期CTCs低水平，整体而言ED-SCLC,病患的中会位CTCs可用为9.5个f 7.5ml滴血，而LD-SCLC仅为1个／7.51111滴血，进一步断言ED-SCLC病患的CTCs低水平大于LD-SCLC病患。

（二）CTCs审核SCLC的及结节病

CTCs应该可作为审核SCLC和结节病的有救指f,匙科学学术界们始终在反思的情况。Houi等在2009年通过CellSearch依此探测了50同上SCLC病患(LD-SCLC20同上，ED-SCLC30同上)的CTCs，辨认出CTCs>300个/7.5ml滴血的病患及CTCs

弧期CTCs>=50和

在该科学研究中会SCLC病患的结节病并不一定倍数原作8个/7.5ml滴血，以此将病患划分CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年都只领域CellSearch依此探测59同上SCLC病患在弧期、1生命期化学疗依此后及4生命期化学疗依此就此结束后外固滴血CTCs低水平，其中会ED-SCLC病患38同上，LD-SCLC病患2 1同上c弧期有43同上病患(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml滴血，CTCs>215个/7.5ml滴血和CTCs

经过1生命期化学疗依此后病患CTCs低水平轻扰降低，且1生命期化学疗依此后CTCs

科学学术界推断CTCs低水平是SCLC结节病的独立负面影响遗传物质，其中会1生命期化学疗依此后CTCs低水平是SCLC和结节病最强的预测遗传物质。

2013年ASCO发表的ECOG1508科学研究中会，科学学术界为了让在155同上ED-SCLC中会自组凋亡疗依此，并对其中会123同上病患弧期CTCs进行时探测，整体而言凋亡疗依此没能缩窄ED-SCLC病患的PFS和OS，但辨认出弧期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml滴血的mPFS共有4.4和4.3个年初（P=0.07），OS共有10.7和7.2个年初(P=0.01)。科学学术界忽视虽然凋亡疗依此不曾能进一步提高ED-SCLC病患的PFS和OS，但却辨认出了CTCs显然是SCLC病患的结节病一个大。

要到先，Igawa等为了让领域OBP-401试验中探测SCLC病患肺脏滴血CTCso领域OBP-401试验中探测乳脑肉瘤和胃癌病患CTCs的就其科学研究已有前期报道。科学研究划定30同上韧治的SCLC病患，29同上病患(96%)肺脏滴血CTCs阳性。在弧期，21同上病患CTCs

（三）CTCs追踪SCLC的住院和分散

现有的科学研究表明通过探测CTCs的注意到来追踪SCLC的住院和分散带有重要的医学内涵o Tanaka等科学研究辨认出CTCs低水平‘j 125同上前列腺癌病患（仅限于9同上SCLC病患）进展轻扰就其，都有是与周围分散紧密（AUC-ROC 0,873 p

基于这些数据资料，作者忽视CTCs可作为追踪前列腺癌周围分散的微生物标记物。Natio等科学研究辨认出SCLC在弧期、疗依此就此结束后及住院后CTCs的阳性率共有68.6%、26.5%和67.6，示意SCLC住院后肺脏学CTCs低水平急剧下降，时有发生周围分散人体内的个数为0、1和>=2的病患其中会位CTCs可用共有2.0、7.5和21个/7.5ml滴血,示意CTCs低水平与周围分散人体内的个数有关，周围分散越多，CTCs可用越短（p

三、CTCs在SCLC医学领域中会的探究斜向

住院和分散是加剧病患疗依此失利和死亡的主要原因，适时辨认出的住院和分散并采敢更进一步理论上的疗依此措施可显著进一步提高病患几率。然而，由于SCLC不够能够追踪住院和分散的微生物一个大，且都只影像学检查尚未辨认出扰分散灶及扰小残留病灶，加剧时有发生住院和分散的SCLC病患不用适时拒绝接受临床和疗依此。

医学中会之外LD-SCLC的病患结节病相似之处较大，示意有些局限于期的病患在临床时显然已时有发生了影像学不用辨认出的扰分散而踏入潜在的为广泛期病患。通过探测肺脏滴血CTCs的注意到及个数波动从而对SCLC病患体内状态进行时实时、动态地追踪和评价，适时辨认出的住院、分散，将最大限度医学医生对疗依此尽要到的认清和疗依此作依此的选择，但究竟CTCs的个数或波动倍数为多较少时能够精确凸显SCLC的住院或分散尚不明确，需要更多的循证医学证据不作支持。

CTCs在审核SCLC病患疗依此各个方面的领域尚属于探究阶段，疗依此过程中会CTCs个数的波动与SCLC病患化学疗依此的就其性及其与SCLC病患放疗尽要到的选择等情况在将来需大量的医学科学研究。有约5年，对CTCs应该可作为SCLC病患结节病指标的科学研究日益增多，但SCLC最佳的结节病CTCs并不一定倍数尚无确证，争议较少有。

其中会3项来自Hou、Naito、Hiltermann的科学研究将SCLC的结节病CTCs畀定倍数分别原作为50、8和2个／7.5ml滴血，相似之处很大，这显然与科学研究采用的统计学作依此不尽相同以及入组样本量较较少有关。有约期那不勒斯语言学家Normanno等论点将ED-SCLC和LD-SCLC病患分开科学研究，对弧期、l生命期化学疗依此后CTCs以及疗依此前后CTCs的波动倍数分别原作结节病并不一定倍数，为将来的科学研究提供了新的出发点。；也所在的科研制作组也正致力于必先SCLC病患结节病最佳CTCs并不一定倍数的科学研究，结果最让人期盼。

的表征学疗依此依此是疗依此模式的的发展斜向。SCLC病患对化学疗依此口服的自由基存有轻扰的类似之处，其主要原因显然与复杂的异质性、基因表达相似之处及多态性有关。所以，逐步明晰SCLC的真核微生物学特征对借助于真正内涵上的SCLC表征学疗依此依此尤为重要。有约期必先语言学家王洁等科学研究人员通过领域单线粒体基因脱氧核糖核酸手段对病患单个CTC进行时全都真核微生物、外显子真核微生物脱氧核糖核酸。

在此项科学研究中会，谢晓亮讲师发明者的多重退火和加成自由基重复的扩增高效率(MAIBAC)，顺利借助于了对病患肺脏滴血单个CTC的全都真核微生物扩增和深度脱氧核糖核酸，在单个线粒体低水平探测全都真核微生物基因拷贝数反转(CNVs)和单核苷酸反转(SNVs)o单线粒体低水平CTCs真核微生物脱氧核糖核酸高效率可适时提供如耐药遗传病等表征学疗依此依此所需的重要信息，同时也为将来SCLC凋亡口服的开发提供高效率支持。

SCLC组织遗骸不易提供，容许了不足之处各项常规科学研究的开展，而运用CTCs构建的SCLC重复线粒体超级任天堂肉瘤( CTC-derived explants，CDXs)基本概念，年末化解这一棘手难题。要到先，Hodgkinson等为了让将6同上ED-SCLC病患lOml肺脏滴血中会的CTCs提取后口服到免疫缺陷小鼠腹膜，结果在4只小鼠身上逐步形成了CDXs，断言SCLC病患的CTCs带有致肉瘤性。

同时领域CelISearch依此探测这6同上SCLC病患的CTCs，整体而言顺利逐步形成CDXs的4同上病患的CTCs可用以外>400个／7.5ml滴血，而另外2同上尚未逐步形成CDXs的病患其CTCs可用共有222和20个／7.5ml滴血，示意SCLC的CTCs致肉瘤性与肺脏滴血CTCs教量有关。进一步量化辨认出相比于化学疗依此持久性SCLC，化学疗依此抗性SCLC病患的CDXs愈来愈多时间窄、落叶更迅速。对3同上CDXs给予顺铂和连成一片泊苷化学疗依此口服，其持久性顺序为CDX3>CDX2>CDX4，相应病患的OS共有9.7.3.5.0.9个年初，示意对CDXs进行时体内药敏试验中可以间接自由基病患求生时间。

该科学研究结果显示之外SCLC的肺脏滴血CTCs带有小鼠属性，可进行时体内培养、逐步形成与原发整体类似于的CDXs，为SCLC病患的体内药敏试验中、耐药机制量化等一系列常规科学研究提供了可用的组织，化解了SCLC病患遗骸缺较少过剩的情况。

论证

从现行的科学研究可以说明了，虽然CTCs在SCLC中会的医学领域仍属于探究阶段，但期望广阔。现阶段，诸多转化性科学研究正在进行时中会，相信随着科学研究的不断深入，CTCs年末踏入SCLC的有所突破口，期盼CTCs在SCLC的领域中会为我们造就最让人兴奋。

编辑： 雪